凝血功能检测的基本试验主要包括:凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血酶时间、纤维蛋白原及各种凝血因子的活性。鉴于凝血反应是酶促的一系列连锁反应,导致检测结果容易出现误差。影响凝血试验的因素可分为以下几类:
(一)标本及实验室检查
1.标本采集:采集一般选择清晨患者未起床时。(1)情绪激动、剧烈运动均会致血小板增多,凝血及纤溶活性增强。(2)高脂饮食会使血脂肪浓度上升,从而抑制纤溶活性。(3)吸烟加速血小板聚集。(4)酗酒抑制血小板聚集,并且可以抑制肝脏合成维生素K依赖的凝血因子ⅡⅦⅨⅩ。
2.采血时机:输液侧不能采血,采血带不宜扎得太紧,以免因子Ⅷ和组织纤溶酶原激活剂释放活化。注血液入试管时不可太用力,以免血细胞破碎激活凝血系统。
3.标本制备:标本最好在采集1h内分离血浆,在3000r/min转速下离心,取乏血小板血浆。(血小板的数量会明显影响APTT)。制备过程中防止出现溶血,红细胞膜含有大量磷脂和胆固醇,有促凝作用。
4.标本运送:需在常温下进行,低温会损伤血小板、因子Ⅶ Ⅺ,从而使PT及APTT延长。
5.试剂选择:对于口服抗凝药物检测 PT,试剂必须按WHO的要求进行标化,结果以国际标准化比值报告。抗凝剂应该使用柠檬酸钠抗凝剂并严格按照1:9抗凝。当红细胞比容>55%或<25%时,应按照以下公式重新计算抗凝剂用量:0.00185*全血量ml*(100-HCT)。
(二)药物影响因素
1.华法林:华法林是维生素K拮抗剂,主要影影响Ⅱ、Ⅶ、 Ⅸ和Ⅹ因子的羧基化,常用PT-INR监测,,PT-INR是反映外源凝血系统的实验指标,INR的增大,主要因Ⅱ、Ⅷ和X因子的活性降低,而Ⅸ、II和X因子又是内源及共同途径中的凝血因子,因此,内源凝血筛选指标APTT也同样受影响.此外,机体内的抗凝系统——蛋白C系统,它的合成也受维生素K的影响。蛋白C系统包括蛋白C(PC)、蛋白S(Ps)、凝血酶调节蛋白(TIM)和活化蛋白C抑制物(APCI),其中蛋白C是依赖维生素K的生理性抗凝物质,蛋白S是依赖维生素K的活化蛋白C辅因子,两者都在机体抗凝系统中发挥重要作用。由此看来,华法林的药理机制对蛋白C系统也会产生影响。它同时作用于凝血和抗凝两大机制,破坏了机体凝血机制的平衡。
2.肝素:肝素是通过AT一3发挥抗凝作用的,主要影响IXa、Xa、IIa、XIa等因子的活性而抗凝,APTT是—个敏感的代表内源凝血系统的试验指标,肝素对其作用主要因IXa、Xa、 IIa活性降低,而Xa 和IIa是共同途径中的凝血因子,因此对PT-INR也有一定影响。
3.与阿司匹林有协同作用的药物,比如:阿司匹林、保泰松、氯霉素、长效磺胺、水合氯醛、螺内酯、布地奈德、塞来昔布、氯雷他定、别嘌醇、西咪替丁等质子泵抑制剂、辛伐他汀等降脂药等,大剂量应用青霉素也可使PT、APTT、INR明显延长,大剂量头孢类抗生素可明显抑制肠道杆菌,影响维生素K吸收,导致因子II、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ因子合成障碍,使凝血时间明显延长。
来源:中国风湿病公众论坛
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